De folgjende analyze fan mooglike problemen ynBuccalswab/FTA card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

De suveringskolom is ferstoppe

Yn dizze kit, yn 'e genomyske DNA-ekstraksje-operaasje, wurdt de suveringskolom direkt geadsorbeerd op it enzymatyske lysis-gemik fan' e sample sûnder sintrifugaasjestap, en de suveringskolom kin wurde blokkearre fanwegen ûnfolsleine enzymisaasje en hege viskositeit fan 'e stekproef.

De folgjende mooglike oarsaken binne as folget:

1. Unfolsleine enzymatyske fersmoarging fan weefselmonsters.

Oanrikkemedaasje: De sampleferwurkingstiid fan Foregene Protease kin passend wurde ferlingd as de supernatant kin wurde nommen nei sintrifugering by 12.000 rpm (~ 13.400× g) foar 5 min.

2. Oermjittich gebrûk fan weefselmonsters of grutte weefsels.

Oanbefelling: It is it bêste om net mear as 1 te wêzenBuccal swab yn 'e stekproef;as de stekproef is te grut, fergrutsje de dosering fan Buffer ST1, Foregene Protease, buffer ST2 accordingly.

3. De sample viscosity is te heech.

Oanbefelling: Samples kinne passend wurde verdund mei 10 mM Tris-HCl foardat genomyske DNA-ekstraksje.

4. Fragminten fan de bloedkaart binne sûge.

Oanbefelling: De transiente sintrifugaasjetiid fan stap 6 fan genomyske ekstraksje fan bloedplak (FTA Card) kin passend wurde ferlingd.

Lege opbringst of gjin DNA

D'r binne faak in ferskaat oan faktoaren dy't ynfloed hawwe op genomyske DNA-opbringst, ynklusyf sample oarsprong, sample opslachbetingsten, sample tarieding, manipulaasje, ensfh.

Genomysk DNA kin net wurde krigen tidens ekstraksje

De mooglike oarsaken binne as folget:

1. Unjildich behâld fan samples of opslach foar te lang liedt ta genomyske DNA-degradaasje.

Oanbefelling: Orale swabs moatte leafst farsk sampled wurde, en it is net oan te rieden om bewarre swabs te brûken foar genomyske DNA-ekstraksje operaasjes;bloedspotmonsters moatte derfoar soargje dat de kwaliteit kwalifisearre is en de opslachtiid moat net te lang wêze.

2. Te min weefselgebrûk kin resultearje yn gjin ekstraksje fan it oerienkommende genomyske DNA.

Oanbefelling: Folgje debuccal swab sampling ynstruksjes yn de operaasje gids, en wipe safolle kearen mooglik, sadat genôch sellen kinne wurde hechte oan de mûnlinge swab foar genomic DNA ekstraksje;foar ekstraksje fan bloedspotmonsters kin it bloedspotsnijgebiet passend ferhege wurde.

3. Foregene Protease wurdt ferkeard bewarre bleaun, wat resulteart yn in fermindering fan har aktiviteit of ynaktivaasje.

Oanrikkemedaasje: Befêstigje de opslach betingsten fande Foregene Protease of ferfange troch in nije Foregene Protease foar enzymatyske reaksje.

4. Unjildich behâld fan 'e kit of opslachtiid is te lang, wat resulteart yn it mislearjen fan guon komponinten yn' e kit.

Oanbefelling: Keapje in nijBuccal swab DNAisolaasje kit foar besibbe prosedueres.

5. Buffer WB foeget gjin absolute ethanol ta.

Oanbefelling: Befêstigje dat buffer WB it juste folume fan absolute ethanol tafoeget.

6. De eluent is net korrekt tafoege oan 'e silikonfilm.

Oanbefelling: 65 tafoegje°Cfoarferwaarme eluent falt nei it midden fan it silikonmembraan en lit 5 min op keamertemperatuer litte om de effisjinsje fan eluaasje te ferheegjen.

Low-opbringst genomysk DNA ôfsûnderje

De folgjende mooglike oarsaken binne as folget:

1. Unjildich behâld fan samples of opslach foar te lang liedt ta genomyske DNA-degradaasje.

Oanbefelling: Orale swabs wurde by foarkar farsk sampled, en bewarre swabs moatte net brûkt wurde foar genomyske DNA-ekstraksje.

2. As de hoemannichte weefselmonster te lyts is, sil de ekstrahearre genomyske DNA-ynhâld minder wêze.

Oanbefelling: Folgje de ynstruksjes foar sampling fan mûnlinge swab yn 'e bestjoeringsgids, wiskje safolle kearen mooglik sadat genôch sellen oan' e mûnlinge swab kinne wurde hechte foar genomyske DNA-ekstraksje.

3. Foregene Protease wurdt ferkeard bewarre bleaun, wat resulteart yn in fermindering fan har aktiviteit of ynaktivaasje.

Oanrikkemedaasje: Befêstigje de opslach betingsten fanthe Foregene Protease of ferfange it mei in nij Forgene Protease foar enzymatyske reaksje.

4. Eluentproblemen.

Oanbefelling: Brûk Buffer EB foar eluaasje;as jo ddH brûke₂O of oare eluenten, befêstigje dat de pH fan it eluaat tusken 7.0-8.5 is.

5. It eluaat is net goed dripke tafoege.

Oanbefelling: Foegje eluentdruppels ta oan 'e midden fan' e silikonmembraan en lit 5 min op keamertemperatuer litte om de effisjinsje fan eluaasje te ferheegjen.

6. De elueringsvloeistof accumulearret te min.

Oanbefelling: Brûk eluent foar genomyske DNA-eluaasje lykas fereaske yn 'e ynstruksjes, op syn minstnet minder oer 15μl.

Low rein of genomysk DNAôfsûnderje

Lege genomyske DNA-suverens kin liede ta mislearring of ûnfoldwaande resultaten fan streamôfwerts eksperiminten, lykas: enzymen kinne net iepen wurde, PCR kin it genfragmint fan belang net krije, ensfh.

De mooglike oarsaken binne as folget:

1. Heteroprotein fersmoarging, RNA fersmoarging.

Analyse: De suveringskolom waard net wosken mei Buffer PW;de buffer PW wask suvering kolom waard net wosken mei help fan de juste centrifugal snelheid.

Oanbefelling: Soargje derfoar dat d'r gjin delslach is yn 'e supernatant foardat jo ethanol tafoegje;wês wis dat jo de suveringskolom waskje neffens de ynstruksjes, en dizze stap kin net weilitten wurde.

2. Unreinens ion fersmoarging.

Analyse: Buffer WB wask suvering kolom waard weilitten of wosken mar ien kear, resultearret yn oerbleaune ionyske fersmoarging.

Oanrikkemedaasje: Wês wis dat jo Buffer WB 2 kear waskje lykas oanjûn om oerbliuwende ioanen safolle mooglik te ferwiderjen.

3. RNA enzyme fersmoarging.

Analyse: Bûtenlânske RNases waarden tafoege oan buffer;Buffer PW wask operaasje wie ferkeard, resultearret yn RNase residuen, beynfloedzje downstream RNA eksperimintele operaasjes, lykas in vitro transkripsje.

Oanbefelling: Foregene rige nucleic acidisolationkits kinne RNA fuortsmite sûnder ekstra tafoeging fan RNase,dus buccale Swab / FTA Card DNA Isolaasje Kitnedich't add RNase;wês wis te folgjen de ynstruksjes foar Buffer PW waskjen suvering kolom, en dizze stap kin net weilitten.

4. Etanol residu.

Analyse: Buffer WB hat gjin lege buis-sintrifugaasje útfierd nei it wassen fan de suveringskolom.

Oanbefelling: Fier de juste lege buis centrifugation operaasje út neffens de ynstruksjes.

5. Oare ûnreinensfersmoarging.

Analyse: Opsleine samples as spesjale samples wurde net foarbehannele.

Oanrikkemedaasje: Behannelje it stekproef goed foar as ynstruearre.