1: Ferfange de eksperimintele foarrieden yn 'e tiid

Stel (NTC) negative kontrôle op en werhelje it in protte kearen.Sadree't it wurdt fûn dat der PCR-produkt fersmoarging yn it laboratoarium, ferfange alle eksperimintele foarrieden yn 'e tiid.Sa as: de primers op 'e nij ferwetterje en tariede, de pipettepunt, EP-buis, ddH2O, ensfh., opnij sterilisearje, ferfange troch in nije pipet, en tydlik oare laboratoaria liene om PCR-eksperiminten út te fieren.It fersmoarge laboratoarium sil wurde fentilearre en bestraald mei ultraviolette strielen oant de kontaminaasje fan it PCR-produkt is elimineare foardat jo trochgean mei it eksperimint.

2: Ferlingje UV-eksposysjetiid

It is de muoite wurdich opskriuwen dat te ferwiderjen DNA fersmoarging, reguliere ultraviolet strieling moatte wurde ferlingd mei 2 oeren as gewoanlik.Dochs is it effekt fan UV-bestraling op it fuortheljen fan lytse fragminten (ûnder 200bp) fan DNA-fersmoarging noch altyd net goed.

Ultraviolet golflingte (nm) is oer it algemien 254/300nm, en it is genôch om 30 minuten te bestralen.It moat opmurken wurde dat by it kiezen fan UV om de fersmoarging fan residuele PCR-produkten te eliminearjen, de lingte fan it PCR-produkt en de ferdieling fan basen yn 'e produktsekwinsje moatte wurde beskôge.UV-bestraling is allinnich effektyf foar lange fragminten boppe 500 bp, en hat net folle effekt op koarte fragminten.

Tidens UV-bestraling sille de pyrimidinebasen yn it PCR-produkt dimers foarmje.Dizze dimers kinne de útwreiding beëinigje, mar net alle pyrimidinen yn 'e DNA-keten kinne dimers foarmje, en UV-bestraling kin de dimers ek brekke..De graad fan dimerfoarming hinget ôf fan 'e UV-golflingte, it type pyrimidine-dimer en de folchoarder fan nukleotiden neist de dimer-side.Dêrom, as de PCR-amplifisearre fragminten lyts binne, wurdt it oanrikkemandearre om it UNG-anty-PCR-produktkontaminaasjesysteem te brûken.

3: Gewoan brûkte DNA-fersmoargingsreinigers

Aerosolen wurde maklik oanmakke as pipetten wurde tafoege, wat lestich te foarkommen is, en it sil gau fêstigje.Dêrom is it sûnder mis in goede kar om faak spesjale DNA-fersmoargingsreinigers te brûken om de fersprieding fan DNA-fersmoarging te foarkommen.

4: Brûk UNG anty-fersmoarging systeem

Nei't de kontaminaasje fan it PCR-produkt is fuortsmiten, kin it testlaboratoarium it UNG anty-PCR-produktkontaminaasjesysteem brûke om kontaminaasje fan PCR-produkten te foarkommen.Yn algemiene laboratoaria kinne jo ienfâldige eksperimintele partysjes útfiere, it PCR-produktgebiet strikt skiede fan oare gebieten, bepaalde laboratoariumregels en regeljouwing fêststelle, en relevante training útfiere om it foarkommen fan PCR-produktfersmoarging te foarkommen.

Oanbefellings: It oprjochtsjen fan in ridlik PCR-laboratoarium, it behâld fan in goede PCR-omjouwing, it formulearjen fan standert PCR-operaasjeprosedueres, en it kultivearjen fan it strange operearjende bewustwêzen fan eksperiminten binne de kaaien om de fersmoarging fan PCR-eksperiminten te foarkommen of te ferminderjen.