Laboratoariumtesten begjint mei samplesammeling, en samplesammeling is it maklikst om te oersjen.It wichtichste ding foar it sammeljen fan samples is it juste sampletype te selektearjen, passende sampling-ark te brûken en ridlik ferfier en ferwurking út te fieren.

I.Sample type

Algemiene sampletypen binne as folget:

De samplingmetoade kin ferwize nei de technyske spesifikaasjes foar miljeumonitoring fan it nije coronavirus yn 'e agraryske hannel (bazaar) merk ":

1. Swab-samples út keel-swabs, hannen, klean en oare objekten fan praktiken: it is ferplichte om de firusbehâldoplossing te brûken yn 'e firussamplingbuis en de sampling-katoenen swabs folslein te ynfiltrearjen.It oerflak fan 'e grûn) wurdt meardere kearen tapast en wosken foar mear as 3 kear.Tagelyk is it nedich om multi-punt ferdield sampling út te fieren op it oerflak fan it sampled foarwerp.

2. Food oerflak swab samples: Food samples kinne net sammele wurde direkt.It te sammeljen iten moat foarsichtich skieden wurde en wurde opslein yn in skjinne samplingtas foar it sammeljen fan swabmonsters.It is ferplichte om de oplossing foar behâld fan firus te brûken yn 'e firus-samplingbuis, nei it folslein wekken fan de sampling-wattenstaafje, om it oerflak fan it te sammeljen itenmonster mear dan 3 kear meardere kearen te smeren en te spoelen.Tagelyk is it nedich om multi-punt ferspraat sampling út te fieren op it stekproef oerflak.

3. Riolearring samples: Neffens de ferdieling fan it ôfwettering systeem yn 'e merk, selektearje 2-3 rioelwetter sampling lokaasjes, rjochte op de ynterne pipe netwurk kolleksje, de streamôfwerts fan it wetter stream rjochting, of de ferbining mei de gemeentlike pipe netwurk.Om in swabmonster te sammeljen, dompelje it yn 'e rioel mei in sampling katoenen swab om it it rioelwetter te adsorbearjen en spoel it yn' e samplingbuis mear dan 3 kear.Om rioelmonsters te sammeljen, brûke polyetyleen plestik flessen om 30-500 mL rioelwettermonsters te sammeljen;foar riolearring sammeljen mei in folume grutter as 500 mL, polyetyleen plestik emmers of on-site wetter sample spesjale ferriking apparatuer kin brûkt wurde.Tagelyk is it nedich om mearpuntsferdielde sampling te fieren foar de rioelmonsterlokaasje.

4. Diermonsters: Foar libbene bisten kinne sampling-swabs brûkt wurde om lichemsflaters, orofaryngeale swabs en anale swabs te sammeljen, en ekkremint of sekretemonsters kinne ek sammele wurde en neffens it rekordblêd opnommen wurde.Foar diermonsters dy't skinning hawwe ûndergien, ensfh., Brûk katoenen swabs om har lichemsoerflak en lichemsholte swabmonsters te sammeljen.It is nedich om de oplossing foar behâld fan firus yn 'e firussamplingbuis te brûken om de sampling-wattenstaafje folslein te infiltrearjen, en dan werhelje de tapassing fan it oerflak fan it te sammeljen itenmonster.Shabu mear as 3 kear.Tagelyk is it nedich om multi-punt ferspraat sampling út te fieren op it stekproef oerflak.

5. Oare apparaten: konteners foar it ferfieren en fokken fan bisten lykas hokken of fisktanks.Earst, observearje of begripe de spesifike soarten bisten opslein en fokt yn 'e kontener, en sammelje swabmonsters op' e binnenmuorre fan 'e kontener as floeibere monsters fan' e ynhâld.

6. Sammelje aerosol-samples yn gebieten dêr't minsken sammelje, min fentilearre pleatslike hannelsgebieten, kantoaren en rêstkeamers.

II.Sampling ark
1. Bloedsamling tube
As jo ​​moatte dwaan nucleic acid testen en antikoagulant samples letter, It is oan te rieden om te brûken in fakuüm bloedfetten befetsje EDTA antikoagulant te sammeljen bloed;foar serummonsters is it oan te rieden om in fakuüm bloedfet te brûken sûnder antikoagulant.

2. Sampling swab

It is oan te rieden om polypropylene swabs te brûken ynstee fan kalsiumalginate swabs of swabs mei houten peallen, om't se stoffen kinne befetsje dy't bepaalde firussen ynaktivearje en PCR-testen ynhibearje.Swabs mei katoenen hollen kinne net brûkt wurde, omdat katoen fezels hawwe in sterke adsorption fan proteïne en wurde net maklik eluted yn de folgjende behâld oplossing.

Yn 'e "Technyske spesifikaasjes foar 10-yn-1 mingde kolleksje en opspoaring fan nije Coronavirus-nukleïnesoeren", is dúdlik bepaald dat "de sampling-swab moat wurde makke fan polyester, nylon en oare net-katoen en net-kalsiumalginaatmaterialen, en de handgreep moat wurde makke fan net-hout materiaal.It brekpunt is sawat 3 sm fan 'e boppekant fan' e swabkop, dy't maklik te brekken is.

De CDC yn 'e Feriene Steaten neamde ek "Brûk allinich swabs fan syntetyske fibers mei plestik of draadskaften.Brûk gjin kalsiumalginaat-swabs of swabs mei houten shafts,om't se stoffen befetsje kinne dy't guon firussen ynaktivearje en PCR-testen remme.

Op it stuit in soad brûkt wurdt in wegwerp sterile nylon flocking swab kombinearre mei in plestik staaf.De flocking swab hat better wetter absorption en release rate.Neffens ferskate sampling sites, de swab holle hat ek ferskillende maten en fezels.De dikte.”

3. Sample transport behâld oplossing

Firus inactivation behâld oplossing: in passende hoemannichte guanidine sâlt konsintraasje en in ferskaat oan firus lysis komponinten kinne direkt lyse it firus te release nucleic acid, inactivate RNase en DNase, en soargje foar de yntegriteit fan nucleic acid, dat kin brûkt wurde foar folgjende qPCR detection.It kin net brûkt wurde foar firuskultivaasje en isolaasje.

Firustransport en behâld oplossing: befettet sâlten, aminosoeren, vitaminen, glukoaze en proteïne nedich foar it fuortbestean fan it firus, wat de aktiviteit fan it firus kin behâlde.It kin brûkt wurde foar de ekstraksje en opspoaren fan it firus yn 'e takomst, en it kin ek brûkt wurde foar it kweken en skieden fan it firus.

4. Sample behâld buis en sample tas

De sample opslachbuis moat in sterile plestik buis wêze mei in skroefdop dy't gjin nukleïnesûr adsorbearret.Elke stekproefbuis moat wurde bedekt mei in stekproef om lekkage en fersmoarging fan 'e stekproef te foarkommen.

III.Ynterferearjende stoffen yn 'e stekproef

Ynterferearjende stoffen yn PCR-eksperiminten

1. endogenous interferent

Substanzen oanwêzich yn it lichemmonster kinne ynterferearje mei de deteksje fan oare stoffen.

Bloed:heme (>1mg/ml), hemin (>0.1ng/μl), triglyceride, IgG, ensfh.;

Urine:urea (20 mM);

Stoel:plant polysaccharides, cholate;

Weefsel:protease, kollagen;

Molke: protease, kalsiumion;

Drugs: antibiotika, antivirale medisinen, hormonen, ensfh.

oar.

2. exogenous interferent

It komt fan stoffen dy't it opspoaren fan oare stoffen yn vitro hinderje kinne.Sample additieven en stoffen dy't kinne wurde kontakt opnommen tidens sample sammeljen en ferwurkjen:

Test foarrieden: serum skieding gel, monster samling container en rubberen stopper, katheter, katheter spoelvloeistof, handschoen poeder, etc.

Anticoagulant: heparine (>0.1 U/mL), EDTA (>0.5 mM), ensfh.;

Organyske solvents: isopropanol (>0,1 IU/ml), betaine, dimethylsulfoxide, formamide, glycerine, PEG, ensfh.

Desinfektanten: alkoholen (ethanol>1%), aldehyden, fenolen (fenol>0,2%), peroxides, sterke soeren (HCL), sterke alkalis (NaOH), ensfh.;

Reinigingsmiddel:SDS (>0,005%);

Ierde: Humus

Kleurstof: Yndigo

oar.

Under werklike samplingbetingsten bûten, lykas it sammeljen fan miljeumonsters, kinne de samples in ferskaat oan ynterferearjende stoffen befetsje, en de gearstalling fan interferearjende stoffen op elke lokaasje is oars, wat fereasket dat PCR-ynterferinsje-eksperiminten wurde útfierd neffens lokale omstannichheden.

IV.Sample opslach en ferfier betingsten

Fris sammele klinyske eksimplaren moatte binnen 2 oant 4 oeren nei it sammeljen nei it laboratoarium stjoerd wurde by 2 °C oant 8 °C.Bewarje by 4 ℃ binnen 24 oeren.Eksimplaren dy't brûkt wurde foar firusisolaasje en deteksje fan nukleïnesûr moatte sa gau mooglik hifke wurde.Eksimplaren dy't binnen 24 oeren hifke wurde kinne wurde opslein by 4 ° C;eksimplaren dy't net binnen 24 oeren ûntdutsen wurde moatte wurde opslein by -70 ° C of ûnder (as net- Bewarje by 70 ° C yn in kuolkast by -20 ° C).

Gearfetting:De standerdisearre kolleksje, ferfier en opslach fan samples binne essensjeel foar folgjende testen.De falske negativen fan in protte laboratoariumtests wurde feroarsake troch ferkearde kolleksje, ferfier en opslach fan samples dy't liede ta degradaasje fan virale nukleïnesûr.In protte laboratoaren negearje lykwols noch it belang fan sampling.Ik hoopje dat dit artikel elkenien syn oandacht kin wekker meitsje foar sampling en mear wittenskiplike en ridlike sampling meitsje!

Related produkt:

SARS-CoV-2 Fariant Nucleic Acid Detection Kit (I) (Multiplex PCR Fluorescent Probe Method) - Foar detectie fan mutanten út Brazylje, Súd-Afrika en it Feriene Keninkryk