Antistoffen, ek wol immunoglobulinen (Ig) neamd, binne glycoproteins dy't spesifyk bine oan antigenen.
 
Konvinsjonele antykodyk tarieding wurdt produsearre troch it immunisearjen fan bisten en it sammeljen fan antiserum.Dêrom befettet antiserum gewoanlik antykladen tsjin oare net-relatearre antigenen en oare proteïnekomponinten yn it serum.Algemiene antigeenmolekulen befetsje meast meardere ferskillende epitopen, dus konvinsjonele antykladen binne ek in mingsel fan antykladen tsjin meardere ferskillende epitopen.Sels de konvinsjonele serum-antylders dy't rjochte binne tsjin deselde epitoop binne noch altyd gearstald út heterogene antykladen produsearre troch ferskate klonen fan B-sellen.Dêrom wurde konvinsjonele serum-antylders ek wol polyklonale antylders neamd, of koartwei polyklonale antykladen.
 
Monoklonaal antykodym (monoklonaal antykodym) is in tige unifoarm antykodym produsearre troch in inkele B-sel kloan en allinnich rjochte tsjin in spesifike epitoop.It wurdt normaal taret troch hybridomatechnology-hybridoma-antybodytechnology is basearre op selfúzjetechnology, kombinearjen fan B-sellen mei de mooglikheid om spesifike antykladen en myeloma-sellen mei ûneinige groeikapasiteit yn B-selhybridoma's út te skieden.Dizze hybridoma-sel hat de skaaimerken fan in âldersel.It kin ûnbepaalde en ûnstjerlik proliferearje yn vitro lykas myeloma-sellen, en it kin spesifike antykladen synthesisearje en útskiede lykas miltlymfozyten.Troch klonen kin in monoklonale line ôflaat fan in inkele hybridoma-sel, dat is in hybridoma-selline, wurde krigen.De antykladen dy't it produseart binne heul homogene antylders tsjin deselde antygene determinant, dat is monoklonale antylders.
 
Antistoffen besteane as ien of mear Y-foarmige monomeren (dat wol sizze, monoklonale antykladen of polyklonale antylders).Elke Y-foarmige monomer is gearstald út 4 polypeptide keatlingen, wêrûnder twa identike swiere keatlingen en twa identike ljochte keatlingen.Lichte ketting en swiere keten wurde neamd neffens har molekulêre gewicht.De top fan 'e Y-foarmige struktuer is de fariabele regio, dat is de anty-binende side.(Uttreksel út Detai Bio-Monoclonal Antibody Concept)
 
Antibody struktuer
Swiere ketting
Der binne fiif soarten sûchdieren Ig swiere keatlingen, neamd mei de Grykske letters α, δ, ε, γ, en μ.De oerienkommende antykladen wurde IgA, IgD, IgE, IgG en IgM neamd.Ferskillende swiere keatlingen ferskille yn grutte en komposysje.α en γ befetsje likernôch 450 aminosoeren, wylst μ en ε befetsje likernôch 550 aminosoeren.
Elke swiere keten hat twa regio's: de konstante regio en de fariabele regio.Alle antykladen fan itselde type hawwe deselde konstante regio, mar der binne ferskillen tusken antykladen fan ferskate soarten.De konstante regio's fan 'e swiere keatlingen γ, α, en δ binne gearstald út trije Ig-domeinen yn tandem, mei in hinge-regio om syn fleksibiliteit te fergrutsjen;de konstante regio's fan 'e swiere keatlingen μ en ε binne gearstald út 4 Ig-domeinen.De fariabele regio fan 'e swiere keten fan' e antykodyk produsearre troch ferskate B-sellen is oars, mar de fariabele regio fan 'e antykodyk produsearre troch deselde B-sel of sel kloon is itselde, en de fariabele regio fan elke swiere keten is oer 110 aminosoeren in lingte., En foarmje in inkeld Ig-domein.
 
Lichte ketting
D'r binne mar twa soarten ljochtkeatlingen yn sûchdieren: lambda-type en kappa-type.Elke ljochtketen hat twa keppele domeinen: in konstante regio en in fariabele regio.De lingte fan 'e ljochte keten is sawat 211 ~ 217 aminosoeren.De twa ljochte keatlingen dy't yn elke antykodyk binne altyd itselde.Foar sûchdieren hat de ljochtketen yn elke antykody mar ien type: kappa of lambda.By guon legere vertebraten, lykas kraakbeenfisken (kraakbeenfisken) en bonke fisken, wurde ek oare soarten ljochtkeatlingen lykas it iota (iota) type fûn.
 
Fab en Fc segminten
It Fc-segmint kin direkt wurde kombineare mei enzymen as fluorescent kleurstoffen om antystoffen te markearjen.It is it diel dêr't it antykodym klinkt op 'e plaat tidens it ELISA-proses, en it is ek it diel wêr't it twadde antykodyk wurdt erkend en bûn yn immunoprecipitaasje, immunoblotting en immunohistochemy.Antistoffen kinne wurde hydrolysearre yn twa F(ab)-segminten en ien Fc-segmint troch proteolytyske enzymen lykas papaïne, of se kinne wurde brutsen fan 'e hinge-regio troch pepsin en hydrolysearre yn ien F (ab)2-segment en ien Fc-segment.IgG-antyldersfragminten binne soms heul nuttich.Troch it ûntbrekken fan it Fc-segmint sil it F(ab)-segmint net útfalle mei it antigeen, noch sil it wurde fêstlein troch ymmúnsellen yn in vivo-stúdzjes.Fanwegen de lytse molekulêre fragminten en it ûntbrekken fan cross-linking funksje (fanwege it ûntbrekken fan Fc segment), de Fab segment wurdt meastal brûkt foar radiolabeling yn funksjonele stúdzjes, en de Fc segment wurdt benammen brûkt as blokkearjende agent yn histochemical kleuring.
 
Fariabele en konstante regio's
De fariabele regio (V-regio) leit op 1/5 of 1/4 (mei sa'n 118 aminosoerenresten) fan 'e H-keten tichtby de N-terminus en 1/2 (mei sa'n 108-111 aminosoerresten) tichtby de N-terminus fan 'e L-keten.Eltse V-regio hat in peptide ring foarme troch intra-chain disulfide obligaasjes, en elke peptide ring befettet likernôch 67 oant 75 amino acid residuen.De gearstalling en arranzjemint fan aminosoeren yn 'e V-regio bepale de anty-binende spesifisiteit fan it antykodym.Troch de hieltyd feroarjende soarten en folchoarder fan aminosoeren yn 'e V-regio kinne in protte soarten antykladen mei ferskate binende antigeenspesifisiteiten wurde foarme.De V-regio's fan 'e L-keten en H-keten wurde respektivelik VL en VH neamd.Yn VL en VH hawwe de aminosoeren gearstalling en folchoarder fan guon lokale regio's in hegere graad fan fariaasje.Dizze regio's wurde hypervariabele regio's (HVR) neamd.De gearstalling fan aminosoeren en arranzjeminten fan 'e net-HVR-dielen yn' e V-regio binne relatyf konservatyf, dat wurdt de ramtregio neamd.D'r binne trije hyperfariabele regio's yn VL, meastentiids lizze op aminosoerenresiduen 24 oant 34 en 89 oant 97 respektivelik.De trije HVR's fan VL en VH wurde respektivelik HVR1, HVR2 en HVR3 neamd.It ûndersyk en analyze fan röntgenkristaldiffraksje bewiisde dat de hyperfariabele regio yndie it plak is wêr't it anty-antigen bynt, dus wurdt it de komplementariteitsbepalende regio (CDR) neamd.De HVR1, HVR2 en HVR3 fan VL en VH kinne respektivelik CDR1, CDR2 en CDR3 wurde neamd.Yn 't algemien hat CDR3 in hegere graad fan hypervariabiliteit.De hypervariabele regio is ek de wichtichste lokaasje dêr't de idiotypyske determinanten fan Ig-molekulen bestean.Yn 'e measte gefallen spilet de H-keten in wichtiger rol by it binen oan it antigeen.
De konstante regio (C-regio)leit op 3/4 of 4/5 (sawat fan aminosoer 119 nei it C-terminale) fan 'e H-keten tichtby de C-terminus en 1/2 (befettet sa'n 105 aminosûrresiduen) tichtby it C-terminus fan 'e L-keten.Elke funksjonele regio fan 'e H-keten befettet sawat 110 aminosûrresiduen, en befettet in peptidering dy't bestiet út 50-60 aminosûrresiduen ferbûn troch disulfidebindingen.De aminosoeren gearstalling en regeling fan dizze regio binne relatyf konstant yn deselde dier Ig isotype L keten en deselde type H keten.Itselde, it kin allinich spesifyk bine oan it korrespondearjende antigeen, mar de struktuer fan har C-regio is itselde, dat is, it hat deselde antygenisiteit.It hynder anty-minsklike IgG sekundêr antykodyk (of anty-antibody) kin wurde kombinearre mei de twa In kombinaasje fan antylders (IgG) tsjin ferskate exotoxinen komt foar.Dit is in wichtige basis foar it tarieden fan sekundêre antykladen en it tapassen fan fluoresceïne, isotopen, enzymen en oare markearre antylders.
 
 
Relatearre produkten:
Cell Direct RT-qPCR kit