FAQ's foarAnimal Total RNA Isolaasje kit

De folgjende analyze fan 'e problemen dy't jo kinne tsjinkomme yndier weefsel / sel RNA ekstraksje will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

RNA wurdt net ekstrahearre of RNA-opbringsten binne leech

D'r binne faak in ferskaat oan faktoaren dy't de effisjinsje fan herstel beynfloedzje, lykas: RNA-ynhâld fan weefselmonster, wurkwize, elueringsvolumint, ensfh.

1. Iisbad of kryogenic (4 ° C) centrifugation waard útfierd yn operaasje.

Oanbefelling: Operearje by keamertemperatuer (15-25 ° C) troch it hiele proses, net iisbad en sintrifugerje by lege temperatueren.

2. Unjildich sample behâld of oermjittich sample opslach tiid.

Oanrikkemedaasje: Bewarje samples by -80 °C of befrieze yn floeibere stikstof en foarkomme werhelle gebrûk fan frieze-dooi;besykje farsk weefsel as kweekte sellen te brûken foar RNA-ekstraksje.

3. Net genôch monster lysis.

Oanbefelling: As jo ​​weefsel homogenisearje, soargje derfoar dat it weefsel genôch homogenisearre is en dat de weefselsellen genôch splitst binne om de frijlitting fan RNA te ferklearjen.

4. De eluent is net goed tafoege.

Oanbefelling: Befêstigje dat RNase-Free ddH₂O wurdt tafoege dropwise oan 'e midden fan' e suvering kolom membraan.

5. It juste folume fan absolute ethanol waard net tafoege oan Buffer RL2 of Buffer RW2.

Oanbefelling: Folgje de ynstruksjes, foegje it juste folume fan absolute ethanol ta oan Buffer RL2 en Buffer RW2 en mingje goed foardat jo de kit brûke.

6. Tissue sample dosage is net passend.

Oanbefelling: Brûk 10-20 mg weefsel of (1-5) × 10⁶sellen per 500 μl buffer RL1, om't oermjittich weefselgebrûk kin resultearje yn fermindere RNA-ekstraksje.

7. Unjildich elueringsvolume of ûnfolsleine eluaasje.

Oanbefelling: It elueringsvolumint fan 'e suveringskolom is 50-200 μl;as it elueringseffekt net befredigjend is, wurdt it oanrikkemandearre om de pleatsingstiid by keamertemperatuer te ferlingjen nei it tafoegjen fan foarferwaarme RNase-frije ddH₂O, bygelyks foar 5-10 min.

8.De suvering kolom hat ethanol residu nei Buffer RW2 waskje.

Oanbefelling: As d'r ethanol-residu is nei it waskjen fan Buffer RW2, lege buis-sintrifugaasje foar 1min, kin de tiid foar de lege buis-sintrifugaasje-operaasje ferhege wurde nei 2min, of de suveringskolom kin 5 min op keamertemperatuer pleatst wurde om de oerbliuwende ethanol adekwaat te ferwiderjen.

Purified RNA wurdt degradearre

De kwaliteit fan it suvere RNA is relatearre oan faktoaren lykas it behâld fan it stekproef, RNase-fersmoarging, en manipulaasje, ensfh.

1. Tissue samples wurde net op 'e tiid hâlden.

Oanrikkemedaasje: As weefselmonsters of sellen net op 'e tiid wurde brûkt nei it sammeljen, krij dan fuortendaliks by -80 ° C of floeibere stikstof.Om RNA te ekstrahearjen, brûk in nij nommen weefsel- of selmonster wannear mooglik.

2. Werhelle freeze-thawing fan weefselmonsters.

Oanbefelling: By it opslaan fan weefselmonsters is it it bêste om se yn lytse stikjes te snijen foar behâld, en ien fan 'e stikken te ferwiderjen by it brûken fan se om werhelle freeze-ûntdooijen fan it stekproef en degradaasje fan RNA te foarkommen.

3. RNase wurdt yntrodusearre of net wearing wegwerphandschoenen, maskers, ensfh tidens de operaasje.

Oanbefelling: RNA-ekstraksje-eksperiminten wurde it bêste útfierd yn aparte RNA-manipulaasjekeamers en de tafel wurdt wiske foar it eksperimint.

Draach wegwerphandschoenen en maskers tidens it eksperimint om RNA-degradaasje te minimalisearjen feroarsake troch de ynfiering fan RNase.

4. Reagents binne kontaminearre mei RNase by gebrûk.

Oanbefelling: Ferfange mei in nije Animal Total RNA Isolation Kit foar relatearre eksperiminten.

5. De sintrifuge buizen, tips, ensfh brûkt yn RNA manipulaasje binne kontaminearre mei RNase.

Oanrikkemedaasje: Befêstigje dat de sintrifuge buizen, tips, pipetten, ensfh brûkt yn RNA ekstraksje binne allegear RNase-Free.

Purified verkregen RNA beynfloedet streamôfwerts eksperiminten

RNA suvere troch de suvering kolom, as de sâlt ioanen, protein ynhâld is te grut sil beynfloedzje de streamôfwerts eksperimint, lykas: reverse transkripsje, Northern Blot et al.

1. De elutionearre RNA hat sâlt ion resten.

Oanrikkemedaasje: Befêstigje dat it juste folume fan ethanol is tafoege oan Buffer RW2 en útfiere 2 suvering kolom waskjes op de sintrifugale snelheid oanjûn foar operaasje;as d'r in sâlt-ion-residinsje is, lit de suveringskolom 5 minuten nei Buffer RW2 by keamertemperatuer en fiere sintrifugering om it fuortheljen fan sâltfersmoarging te maksimalisearjen.

2. Ethanol residu yn elutioned RNA.

Oanbefelling: Befêstigje dat nei buffer RW2 waskjen, útfiere de lege buis centrifugation operaasje op de centrifugation snelheid oanjûn foar operaasje, fergrutsje de tiid fan de lege buis centrifugation operaasje oan 2 min as der noch ethanol residu, of lit it by keamertemperatuer foar 5 min nei de lege buis centrifugation te maksimalisearjen it fuortheljen fan ethanol residu.

Isolaasje fan nulceic acid sample types

Foregene's RNA-isolaasjekits kinne totale RNA-isolaasje / -ekstraksje krije fan 'e folgjende monstersûzen: Dierweefsel, plant, sellen, viraal, bloed, ensfh.

Hoe bewarje ik de kit

Keamertemperatuer opslach foar 24 moannen.