Animal Total RNA Isolation Kit Totaal RNA-ekstraksje- en suveringskits foar dierlike weefsels en sel
Kit beskriuwing:
Fluch en effisjint ekstrahearje hege suverens en heechweardich totale RNA út ferskate dierlike weefsels.
Gjin needsaak om soargen te meitsjen oer RNA-degradaasje.It hiele systeem is RNase-Free
Ferwiderje DNA effektyf mei DNA-reinigingskolom
Fuortsmite DNA sûnder it tafoegjen fan DNase
Ienfâldich - alle operaasjes wurde foltôge by keamertemperatuer
Snel-operaasje kin yn 30 minuten foltôge wurde
Feilich - gjin organysk reagens brûkt
Hege suverens-OD260/280≈1.8-2.1
Kits Beskriuwings
50 Preps, 200 Preps
Dizze kit brûkt despin kolom en formuleûntwikkele troch ús bedriuw, dat kin extract hege-suverheid en heechweardich totale RNA út ferskate dier weefsels mei hege efficiency.It soarget foar in effisjinte DNA-Cleaning Column, dat kin maklik skieden en adsorbearjen genomic DNA út de supernatant en weefsel lysate, ienfâldich en tiid-besparring;RNA-allinne Kolom kin effisjint bine RNA en kin wurde ferwurke tagelyk mei in unike formule In protte samples.
It hiele systeem is RNase-Free, sadat de ekstrahearre RNA wurdt net degradearre;Buffer RW1, Buffer RW2 buffer wasksysteem, sadat de krigen RNA frij is fan proteïne, DNA, ion, en organyske ferbining fersmoarging.
Kit komponinten
| Animal Totaal RNA Isolaasje Kit | ||
| Kit komponinten | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 T | 200 T | |
| Buffer RL1* | 25ml | 100ml |
| Buffer RL2 | 15ml | 60ml |
| Buffer RW1* | 25ml | 100ml |
| Buffer RW2 | 24ml | 96ml |
| RNase-frije ddH2O | 10ml | 40ml |
| Kolom allinnich RNA | 50 | 200 |
| DNA-reinigingskolom | 50 | 200 |
| Gebrûksoanwizing | 1 stik | 1 stik |
Produkt Ynformaasje
| Formaat | Spin kolom | Reiniging komponint | Foarige kolom, reagens |
| Flux | 1-24 samples | Tiid per prep | ~30 min (24 samples) |
| Centrifuge | Desk centrifuge | Pyrolyse ôfskieding | Centrifugale skieding |
| Foarbyld | weefsel fan bisten;sel | Samples bedrach | Tissue: 10-20 mg;Sel: (1-5) × 106 |
| Eluaasje folume | 50-200 μL | Maksimum laden folume | 850 μL |
Funksjes & foardielen
■ Gjin needsaak om soargen te meitsjen oer RNA-degradaasje;it hiele systeem is RNase-Free
■ Effektyf fuortsmite DNA-gebrûk fan DNA-reinigingskolom
■ Fuortsmite DNA sûnder taheakjen DNase
■ Ienfâldich-alle operaasjes wurde foltôge by keamertemperatuer
■ Fast -operaasje kin foltôge wurde yn 30 minuten
■ Feilich-gjin organysk reagens nedich
■ Hege suverens -OD260/280≈1.8-2.1
Kit applikaasje
It is geskikt foar de ekstraksje en suvering fan totale RNA út in ferskaat oan farske of beferzen dier weefsels of kweekte sellen.
Produkt parameters
■ Downstream applikaasjes: earste-string cDNA synteze, RT-PCR, molekulêre cloning, Northern Blot, etc.
■ Samples: bisteweefsels, kweekte sellen
■ Dosearring: weefsels 10-20mg, sellen (2-5) × 106
■ Maksimum DNA binding kapasiteit fan suvering kolom: 80 μg
■ Eluaasje folume: 50-200 μl
Diagram
Animal Total RNA Isolation Kit behannele 20mg
Farske mûsmonsters, nim 5% suvere totale RNA 1% agar
Glycogel elektroforese
1: Spleen 2: Nier
3: Lever 4: Heart
Opslach en shelf libben
De kit kin wurde opslein foar 24 moannen by keamertemperatuer (15-25 ℃) of 2-8 ℃ foar langere tiid.Buffer RL1 kin wurde opslein by 4 ℃ foar 1 moanne nei it tafoegjen fan β-mercaptoethanol (opsjoneel).
Oanhelle artikels
1.IF:18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., et al.mRNA-laden lipide-like nanopartikels foar bewurkjen fan leverbasis fia de optimisaasje fan sintraal gearstalde ûntwerp.Adv.Funksje.Mater.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.IF:18.187:He X, Hong W, Yang J, et al.Spontane apoptose fan sellen yn therapeutyske stamselpreparaasje oefenet immunomodulatory effekten út troch frijlitting fan phosphatidylserine.Signal Transduct Target Ther.14 jul 2021; 6(1):270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.IF: 17.97: Dai Z, Liu H, Liao J, et al.N7-Methylguanosine tRNA-modifikaasje fersterket onkogene mRNA-oersetting en befoarderet intrahepatyske cholangiocarcinoma-progression.Mol Cell.2021 Jul 29: S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.IF: 9.225: Cao X, Shu Y, Chen Y, et al.Mettl14-Mediated m6A Modifikaasje fasilitearret leverregeneraasje troch it behâld fan endoplasmyske retikulum homeostasis.Cell Mol Gastroenterol Hepatol.2021;12(2):633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
RNA isoaltion kits foar oare sample boarnenbin beskikber:
Sel, plant, viraal, bloed, ensfh.
RNA wurdt net ekstrahearre of RNA-opbringsten binne leech
D'r binne faak in ferskaat oan faktoaren dy't de effisjinsje fan herstel beynfloedzje, lykas: RNA-ynhâld fan weefselmonster, wurkwize, elueringsvolumint, ensfh.
1. Iisbad of kryogenic (4 ° C) centrifugation waard útfierd yn operaasje.
Oanbefelling: Operearje by keamertemperatuer (15-25 ° C) troch it hiele proses, net iisbad en sintrifugerje by lege temperatueren.
2. Unjildich sample behâld of oermjittich sample opslach tiid.
Oanrikkemedaasje: Bewarje samples by -80 °C of befrieze yn floeibere stikstof en foarkomme werhelle gebrûk fan frieze-dooi;besykje farsk weefsel as kweekte sellen te brûken foar RNA-ekstraksje.
3. Net genôch monster lysis.
Oanbefelling: As jo weefsel homogenisearje, soargje derfoar dat it weefsel genôch homogenisearre is en dat de weefselsellen genôch splitst binne om de frijlitting fan RNA te ferklearjen.
4. De eluent is net goed tafoege.
Oanbefelling: Befêstigje dat RNase-Free ddH2O wurdt tafoege dropwise oan 'e midden fan' e suvering kolom membraan.
5. It juste folume fan absolute ethanol waard net tafoege oan Buffer RL2 of Buffer RW2.
Oanbefelling: Folgje de ynstruksjes, foegje it juste folume fan absolute ethanol ta oan Buffer RL2 en Buffer RW2 en mingje goed foardat jo de kit brûke.
6. Tissue sample dosage is net passend.
Oanbefelling: Brûk 10-20 mg weefsel of (1-5) × 106sellen per 500 μl buffer RL1, om't oermjittich weefselgebrûk kin resultearje yn fermindere RNA-ekstraksje.
7. Unjildich elueringsvolume of ûnfolsleine eluaasje.
Oanbefelling: It elueringsvolumint fan 'e suveringskolom is 50-200 μl;as it elueringseffekt net befredigjend is, wurdt it oanrikkemandearre om de pleatsingstiid by keamertemperatuer te ferlingjen nei it tafoegjen fan foarferwaarme RNase-frije ddH2O, bygelyks foar 5-10 min.
8.De suvering kolom hat ethanol residu nei Buffer RW2 waskje.
Oanbefelling: As d'r ethanol-residu is nei it waskjen fan Buffer RW2, lege buis-sintrifugaasje foar 1min, kin de tiid foar de lege buis-sintrifugaasje-operaasje ferhege wurde nei 2min, of de suveringskolom kin 5 min op keamertemperatuer pleatst wurde om de oerbliuwende ethanol adekwaat te ferwiderjen.
Purified RNA wurdt degradearre
De kwaliteit fan it suvere RNA is relatearre oan faktoaren lykas it behâld fan it stekproef, RNase-fersmoarging, en manipulaasje, ensfh.
1. Tissue samples wurde net op 'e tiid hâlden.
Oanrikkemedaasje: As weefselmonsters of sellen net op 'e tiid wurde brûkt nei it sammeljen, krij dan fuortendaliks by -80 ° C of floeibere stikstof.Om RNA te ekstrahearjen, brûk in nij nommen weefsel- of selmonster wannear mooglik.
2. Werhelle freeze-thawing fan weefselmonsters.
Oanbefelling: By it opslaan fan weefselmonsters is it it bêste om se yn lytse stikjes te snijen foar behâld, en ien fan 'e stikken te ferwiderjen by it brûken fan se om werhelle freeze-ûntdooijen fan it stekproef en degradaasje fan RNA te foarkommen.
3. RNase wurdt yntrodusearre of net wearing wegwerphandschoenen, maskers, ensfh tidens de operaasje.
Oanbefelling: RNA-ekstraksje-eksperiminten wurde it bêste útfierd yn aparte RNA-manipulaasjekeamers en de tafel wurdt wiske foar it eksperimint.
Draach wegwerphandschoenen en maskers tidens it eksperimint om RNA-degradaasje te minimalisearjen feroarsake troch de ynfiering fan RNase.
4. Reagents binne kontaminearre mei RNase by gebrûk.
Oanbefelling: Ferfange mei in nije Animal Total RNA Isolation Kit foar relatearre eksperiminten.
5. De sintrifuge buizen, tips, ensfh brûkt yn RNA manipulaasje binne kontaminearre mei RNase.
Oanrikkemedaasje: Befêstigje dat de sintrifuge buizen, tips, pipetten, ensfh brûkt yn RNA ekstraksje binne allegear RNase-Free.
Purified verkregen RNA beynfloedet streamôfwerts eksperiminten
RNA suvere troch de suvering kolom, as de sâlt ioanen, protein ynhâld is te grut sil beynfloedzje de streamôfwerts eksperimint, lykas: reverse transkripsje, Northern Blot et al.
1. De elutionearre RNA hat sâlt ion resten.
Oanrikkemedaasje: Befêstigje dat it juste folume fan ethanol is tafoege oan Buffer RW2 en útfiere 2 suvering kolom waskjes op de sintrifugale snelheid oanjûn foar operaasje;as d'r in sâlt-ion-residinsje is, lit de suveringskolom 5 minuten nei Buffer RW2 by keamertemperatuer en fiere sintrifugering om it fuortheljen fan sâltfersmoarging te maksimalisearjen.
2. Ethanol residu yn elutioned RNA.
Oanbefelling: Befêstigje dat nei buffer RW2 waskjen, útfiere de lege buis centrifugation operaasje op de centrifugation snelheid oanjûn foar operaasje, fergrutsje de tiid fan de lege buis centrifugation operaasje oan 2 min as der noch ethanol residu, of lit it by keamertemperatuer foar 5 min nei de lege buis centrifugation te maksimalisearjen it fuortheljen fan ethanol residu.
