Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (sûnder Sampling Tools) Protokol
Kit beskriuwing:
Brûk dierweefsel lysate direkt as sjabloan foar PCR-amplifikaasje, sûnder aparte ekstraksje fan DNA, fluch en hege gefoelichheid.UNG anty-fersmoargingsysteem tafoege om falske posityfen te eliminearjen.
◮Gjin tiidslinend en djoere DNA suvering is nedich.
◮De fraach nei stekproef is lyts, nim mar ien sied.
◮Gjin spesjale behannelingen lykas slypjen en ferpletterjen binne nedich, en de operaasje is ienfâldich.
◮It optimalisearre PCR-systeem stelt PCR yn steat om hegere spesifisiteit en sterkere tolerânsje te hawwen foar PCR-reaksje-ynhibitoren.
Beskriuwings
Dizze kit brûkt in unyk lysisbuffersysteem om genomysk DNA fluch frij te meitsjen fan monsters fan dierweefsel foar PCR-reaksjes, dus it is benammen geskikt foar grutskalige genetyske testen.
It proses fan it frijlitten fan genomysk DNA út 'e lysisbuffer wurdt binnen 10-30 minuten foltôge by 65 ° C.Gjin oare prosessen lykas proteïne- en RNA-ferwidering binne fereaske, en it frijlitten spoar DNA kin brûkt wurde as sjabloan foar PCR-reaksje.
2 × PCR MaklikTMMix (UNG) brûkt dUTP ynstee fan dTTP op basis fan 2 × PCR EasyTMMix, en foeget UNG enzyme (Uracil-N-glycosylase) dat kin degradearje it sjabloan befettet dUTP tagelyk.Foar de PCR-reaksje wurdt it UNG-enzyme brûkt om it PCR-produkt te degradearjen dat uracil befettet.It UNG-enzyme sil gjin effekt hawwe op 'e sjabloan dy't gjin uracil befettet, en garandearret dêrmei de spesifisiteit en krektens fan amplifikaasje en foarkomt de mooglikheid fan PCR-produkten fersmoarging by grutskalige genetyske testen.
D-Taq DNA-polymerase is in DNA-polymerase spesjaal ûntwikkele troch Foregene foar direkte PCR-reaksjes.D-Taq DNA polymerase hat sterke tolerânsje foar in ferskaat oan PCR reaksje inhibitors, en kin effisjint amplify spoar bedraggen fan DNA yn ferskate komplekse reaksje systemen, en de amplification snelheid kin berikke 2Kb / min, dat is benammen geskikt foar Direct PCR reaksje.
Kit komponinten
| Diel I | Buffer AL |
| Foarige Protease | |
| 6× DNA Loading Buffer | |
| Diel II | 2 × PCR MaklikTMMix (UNG) |
Funksjes & foardielen
■Gjin tiidslinend en djoere DNA suvering
■ De fraach nei stekproef is lyts, sa min as 5mg bisteweefsel kin hifke wurde.
■ Gjin spesjale behanneling lykas slypjen en ferpletterjen is nedich, en de operaasje is ienfâldich.
■ Optimalisearre PCR-systeem makket PCR hegere spesifisiteit en sterker tolerânsje foar PCR-reaksje-ynhibitoren.
■ Anti-fersmoarging PCR-systeem 2×PCR MaklikTMMix (UNG) elimineert effektyf de fersmoarging feroarsake troch PCR-produkten en soarget foar de spesifisiteit en krektens fan amplifikaasje.
Kit parameters
Applikaasje: in ferskaat oan bisteweefsels.
DNA frijjûn út sample lysis: allinnich brûkt as in PCR sjabloan.
De kit kin brûkt wurde foar de folgjende doelen: identifikaasje fan transgenosis, dier genotyping, ensfh.
Wurk flow
Opslach en Shelf libben
Diel I fan dizze kit moat wurde opslein op 2-8℃.
De reagent Buffer AL kin wurde opslein foar 12 moannen ûnder droege omstannichheden;it kin wurde opslein op 2-8℃foar langere opslach.
Reagent Foregene Protease hat in unike formule.Om syn aktiviteit en stabiliteit te garandearjen, bewarje it asjebleaft op 4℃foar 12 moannen.
Reagens 6×DNA Loading Buffer kin wurde opslein op 4℃of -20℃in hiel lang skoft.
Diel II fan dizze kit moat wurde opslein op -20℃.
Reagens 2×PCR MaklikTMMix (UNG), as it faak brûkt wurdt, kin it ek wurde opslein op 4℃foar opslach op koarte termyn (brûk binnen 10 dagen).
