Gidsen foar analyse fan problemen

The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。

Gjin RNA kin ekstrahearre wurde of de opbringst fan nukleïnesûr is leech

D'r binne normaal in protte faktoaren dy't de effisjinsje fan herstel beynfloedzje, lykas: sample RNA-ynhâld, wurkwize, elueringsvolumint, ensfh.

Analyse fan mienskiplike oarsaken:

1.Iisbad of leech-temperatuer (4 ° C) sintrifugering by operaasje.

Suggestje: keamertemperatuer (15-25 ° C) operaasje, nea iis bad en lege temperatuer centrifuge.

2. Unjildich sample opslach of sample opslach foar te lang.

Suggestje: Bewarje samples by -80 ° C of befrieze yn floeibere stikstof, en foarkom werhelle gebrûk fan freeze-dooi;besykje nij sammele samples te brûken foar RNA-ekstraksje.

3.Unfoldwaande sample lysis

Oanbefelling: Soargje derfoar dat it probleem en de wurkoplossing (Linear Acrylamide) yngeand mingd binne en 10 min ynkubeare by keamertemperatuer (15-25 ° C)

4.De eluent is ferkeard tafoege

Oanbefelling: Soargje derfoar dat RNase-Free ddH2O wurdt tafoege oan 'e midden fan it membraan fan' e suveringskolom

5.Improper folume fan anhydrous ethanol yn Buffer viRW2

Suggestje: Folgje asjebleaft de ynstruksjes, foegje it juste folume fan wetterfrije ethanol ta oan Buffer viRW2 en mingje se goed foardat jo de kit brûke.

6.Improper sample gebrûk.

Suggestje: 200µl fan monster per 500µl fan Buffer viRL.Oermjittich sample folume sil resultearje yn redusearre RNA ekstraksje rate.

7.Improper elueringsvolume of ûnfolsleine eluaasje.

Suggestje: It eluentvolumint fan 'e suveringskolom is 30-50μl;as it elueringseffekt net befredigjend is, is it oan te rieden om foarferwaarme RNase-frije ddH ta te foegjen₂O en ferlingje de tiid pleatsing by keamertemperatuer, lykas 5-10min

8.Purification kolom hat ethanol residu nei spoelen yn Buffer viRW2.

Suggestje: As ethanol noch bliuwt nei it spoelen yn Buffer viRW2 en lege-buis-sintrifugering foar 2min, kin de suveringskolom 5min by keamertemperatuer bliuwe nei centrifugaasje fan lege buis om de oerbleaune ethanol folslein te ferwiderjen.

Degradaasje fan suvere RNA-molekulen

De kwaliteit fan it suvere RNA is relatearre oan faktoaren lykas sample opslach, RNase fersmoarging, en operaasje.

Analyse fan mienskiplike oarsaken:

1.De sammele samples waarden net op 'e tiid bewarre.

Suggestje: As it stekproef net op 'e tiid nei sammeling wurdt brûkt, bewarje it dan asjebleaft by -80 ℃ of floeibere stikstof fuortendaliks.Foar de ekstraksje fan RNA-molekulen, besykje nij sammele samples wannear mooglik te brûken.

2.Collected samples waarden freezing en thawing ferskate kearen.

Suggestje: Foarkom werhelle befriezen en ûntdooien (net mear as ien kear) by it sammeljen en opslaan fan monsters, oars sil de opbringst fan nukleïnesûr ôfnimme.

3.RNase waard yntrodusearre yn 'e operaasjekeamer of gjin wegwerphandschoenen, maskers, ensfh.

Suggestje: De winning fan RNA-molekulen eksperimint wurdt it bêste útfierd yn in aparte RNA-operaasjekeamer, en de eksperimintele tafel wurdt skjinmakke foar it eksperimint.Draach wegwerphandschoenen en maskers tidens it eksperimint om RNA-degradaasje te foarkommen feroarsake troch RNase-yntroduksje.

4.De reagens is kontaminearre troch RNase tidens it gebrûk.

Suggestje: Ferfange mei nije Viral RNA Isolation Kit foar relatearre eksperiminten.

5.De RNase fersmoarging fan de sintrifuge buizen, pipette tips, ensfh Suggestie: Soargje derfoar dat de centrifuge buizen, pipette tips, en pipetten binne allegear RNase-Free.

De suvere RNA-molekulen beynfloede streamôfwerts eksperiminten

De RNA-molekulen suvere troch de suveringskolom sille ynfloed hawwe op streamôfwerts eksperiminten as d'r tefolle sâltionen of aaiwiten binne, lykas: omkearde transkripsje, Northern Blot, ensfh.

1.Der binne oerbleaune sâltionen yn 'e eluearre RNA-molekulen.

Oanbefelling: Soargje derfoar dat it juste folume fan anhydrous ethanol is tafoege oan Buffer viRW2, en waskje de suvering kolom twa kear neffens de juste centrifugation snelheid op de operaasje ynstruksjes.Fier dan sintrifugering út om fersmoarging fan sâltionen foar it grutste part te ferwiderjen

2.Der binne oerbleaune ethanol yn 'e eluearre RNA-molekulen

Suggestje: ienris befêstigje dat suvering kolommen binne spoeld troch Buffer viRW2, útfiere lege-buis centrifugation neffens de centrifugal snelheid op de operaasje ynstruksjes.As d'r noch ethanol oerbliuwt, kin it 5 minuten by keamertemperatuer nei in lege buis-sintrifugering wurde litten om de oerbleaune ethanol foar it grutste part te ferwiderjen.

Ynstruksje hânboeken:

Viral RNA Isolation Kit Instruction Manual